基因扩增检验实验室室内设计原则和基本要求
基因扩增检验实验室又称PCR实验室,其特点是能将微量的DNA和RNA大幅扩增,PCR是分子生物学研究和实验的常规方法,广泛运用于生物学各个领域,例如:检验艾滋病、乙型肝炎、丙型肝炎、禽疫病、癌基因的检测,DNA指纹、个体识别、亲子鉴定及法医物证,作物与微生物检测等。
1、PCR实验室平面布局
PCR实验室可根据不同的操作平台设计不同的分区,甚至可只需设置一间,一台仪器可做到从制备一扩增一分析。PCR实验室原则为四个单的工作区域,即试剂贮存区、样本处理区、基因扩增区和扩增产物分析区。各区之间必须完全隔断,不得有空气流通。试剂、样品、实验材料只能按单向流动,即从试剂贮存区一样本制备区一基因扩增区一产物分析区,不得逆向流动。 实验室的气流也应从区流向后区,不得逆向流动。各工作区域应设置缓冲间,工作间与缓冲间之间宜安装连锁装置。不同功能的核酸检验工作区应是分隔立的工作室,并有明显的标志,各区间不能直通。各工作间需安装物品传递窗。每个工作区域的**部应安装紫外灯,安装数量为每20m²安装一只40W的紫外灯,同时应配置可移动紫外灯。
PCR实验室较为理想的布局模式为有一个走廊,试剂贮存区、样本制备区、基因扩增区和产物分析区很规范地排列在一起,各区均设缓冲区,可供换工作服和工作鞋使用,**上需装一盏紫外灯。试剂贮存区和样本制备区工作区域为相对正压;缓冲区域为相对负压。扩增区及扩增产物分析区工作区域为相对负压,缓冲区域为相对正压。 这种压力差可通过送排风装置调节。缓冲间内通向内实验室和走廊的门必须斜对角设置,不宜直接相对,并可安装连锁装置,当一个门打开时,另一个门必须处于关闭状态,防止出现两个门同时打开的情况。缓冲间的门宜能互锁。如果使用互锁门,应在互锁门的附近设置紧急手动互锁解除开关。
每个区域都必须有明确的标记,工作按试剂贮存区、样本制备区、基因扩增区、产物分析区单向进行。
如无法做到以上模式,以下基本要求必须做到:(1)如果使用适时荧光定量PCR扩增仪,扩展区和产物分析区可以合并,使整个PCR室分为三个区,即试剂制备区一标本制备区一扩增分析区。如果使用从样本处理到扩增分析一体化的全自动检测系统,后两区又可以合并,使整个PCR室分为两个区域,即试剂贮存区和基因检测区。
(2)各区完全立,相互之间在工作区域安装物品传递窗。
(3)各个区域必须要有立的缓冲间,供换工作服及鞋子用,并保证与工作区间始终处于相对的分隔状态。
(4)各工作区域和缓冲间均应安装换气装置,以调节气流压力。
(5)各区域间的送排风管道必须立设置,不得联通。
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